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系统性红斑狼疮患者抗中性粒细胞胞浆抗体的检测

发布时间： 2016-07-11 18:13:36 来源：健康族

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系统性红斑狼疮患者抗中性粒细胞胞浆抗体的检测

中华皮肤科杂志1999年第4期第32卷短篇论著

作者：孟庆功袁国华

单位：100853北京,解放军总医院风湿科

抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)是针对中性粒细胞和单核细胞胞浆蛋白的自身抗体。该抗体被普遍认为是系统性血管炎的标记抗体。间接免疫荧光法(IIF)检测ANCA有3种荧光图谱,胞浆型(c-ANCA)、核周型(p-ANCA)和非典型型(a-ANCA)。为探讨ANCA与系统性红斑狼疮(SLE)的关系及其临床意义,我们采用IIF法对63例SLE患者血清进行检测。

一、材料与方法

1.对象:SLE患者63例,为本科住院患者,年龄12～62岁,平均30岁,病程1个月至25年,平均3.8年。所有患者均符合美国风湿病协会1982年的诊断标准。另选择42例正常健康人作为对照。

2.ANCA检测:从正常献血员抗凝血中分离出中性粒细胞,用细胞离心涂片机制备抗原片,1000r/min离心4min,无水乙醇4℃固定5min,吹干。标本血清用0.01mol/LPBS1∶10稀释加在抗原片上,37℃孵育30min,PBS洗3次,每次5min,吹干。加1滴羊抗人IgG荧光抗体(军事医学科学院提供,用时1∶40稀释)于抗原片上,同上37℃孵育30min,PBS洗3次,吹干。加缓冲甘油封片,荧光显微镜下观察结果。中性粒细胞胞浆出现特异性荧光者为c-ANCA,细胞核周围出现特异性荧光者为p-ANCA,不典型荧光着色者为a-ANCA,胞浆及核周围均无特异荧光染色者为阴性。每例标本均进行2次以上检测证实。

3.抗核抗体(ANA)检测:以小鼠肝切片为底物,采用IIF。抗dsDNA抗体采用放射免疫分析法检测。抗ENA抗体采用对流免疫电泳法检测。

4.统计学处理:采用χ2检验。

二、结果

1.42份正常健康人血清均为阴性,63例SLE患者血清26例ANCA阳性(41.3％),其中p-ANCA15例,a-ANCA11例。

2.在ANCA阳性组,浆膜炎及多系统受累的SLE患者明显高于阴性组,而肝损害、肺部病变、皮损及心电图异常在两组之间没有差异(见表1)。抗dsDNA抗体阳性及中度以上贫血(血红蛋白＜90g/L)的SLE患者在ANCA阳性组明显高于阴性组(见表2)。

表1ANCA与SLE临床表现的关系[例数(％)]

临床表现ANCA阳性(26例)ANCA阴性(37例)χ2值P值蝶形红斑13(50.0)16(43.2)0.281＞0.05盘状红斑及紫癜19(73.1)25(67.6)0.220＞0.05口腔溃疡11(42.3)17(45.9)0.082＞0.05腹水4(15.4)5(13.5)0.044＞0.05浆膜炎13(50.0)6(16.2)8.274＜0.01心电图异常6(23.1)14(37.8)1.534＞0.05肺部病变4(15.4)5(13.5)0.044＞0.05肝脏损害6(23.1)3(8.1)2.794＞0.05多系统受累14(53.8)9(24.3)5.741＜0.05表2ANCA与SLE其它实验室检查的关系[例数(％)]

实验室检查ANCA阳性(26例)ANCA阴性(37例)χ2值P值24h蛋白尿＞0.15g/L22(84.6)30(81.1)0.132＞0.05血小板＜100×109/L5(19.2)8(21.6)0.053＞0.05白细胞＜4.0×109/L10(38.5)15(40.5)0.028＞0.05血红蛋白＜110g/L21(80.8)22(59.5)3.200＞0.05＜90g/L12(46.2)8(21.6)4.241＜0.05血沉＞20mm/lh22(84.6)31(83.8)0.008＞0.05ANA阳性26(100)33(89.2)3.000＞0.05坑ds-DNA抗体阳性10/108/17(47.1)7.941＜0.01抗Sm/抗阳性5(19.2)11(29.7)0.888＞0.05抗SSA/抗SSB阳性10(38.5)20(54.1)1.488＞0.05三、讨论

deBandt等[1]在11例SLE患者血清中检测出1例p-ANCA,4例a-ANCA。Lawton和Lee[2]在46例SLE患者中检测出14例p-ANCA。而我们在63例SLE患者中发现15例p-ANCA,11例a-ANCA。在SLE患者血清中未见有c-ANCA的报道。这些不同的荧光图型是由多种抗原成分所致。c-ANCA的主要抗原成分为蛋白酶3(PR3),p-ANCA的主要抗原成分为髓过氧化物酶(MPO),a-ANCA的抗原成分目前尚不清楚。Afelera等[3]的研究发现,抗中性粒细胞胞浆抗原和核抗原的免疫应答不同,本文结果也未发现ANA与ANCA有相关性。

研究认为,ANCA能刺激活性氧离子(ROS)的释放,引起组织损伤[4]。对比ANCA阳性和阴性SLE患者的临床资料,在ANCA阳性患者中浆膜炎发生率为50％,而在ANCA阴性患者中仅为16.2％,二者差异有显著性(P＜0.01)。在ANCA阳性组,多系统受累(53.8％)及中度以上贫血者(46.2％)均明显高于ANCA阴性组(P＜0.05)，提示ANCA与SLE的病情活动有关。Egner等[5]也观察到ANCA在SLE发病或病情复发时升高。有人发现,活动性狼疮肾炎患者血清中ANCA阳性率明显高于非活动性狼疮肾炎患者。而血清抗dsDNA抗体在活动性狼疮肾炎患者血清中也普遍升高。本文结果显示,在ANCA阳性组抗dsDNA抗体阳性率明显高于ANCA阴性组(P＜0.01)，推测ANCA可能与活动性狼疮肾炎有关。

参考文献

1deBandtM,MeyerO,HaimT,etal.Antineutrophilcytoplasmicantibodiesinrheumatoidarthritispatients.BrJRheumatol,1996,35:38－43.

2LawtonJWM,LeeSS.Antineutrophilcytoplasmicantibody(ANCA)insystemiclupuserythematosus(SLE).AmJKidneyDis,1991,2:200.

3AfeleraA,SebastianiGD,GaleazziM,etal.Antineutrophilcytoplasmicantibodiesinsynovialfluidandinserumofpatientswithrheumatoidarthritisandothertypesofsynovitis.Rheumatol,1996,23:10－15.

4EwertBH,JennetteJC,FalkRJ.Thepathogenicroleofantineutrophilcytoplasmicautoantibodies.AmJKidneyDis,1991,2:188－195.

5EgnerW,ChapelHM.Titrationofantibodiesagainstneutrophilcytoplasmicantigensisusefulinmonitoringdiseaseactivityinsystemicvasculitides.ClinExpImmunol,1990,82:244.

(收稿：1998－08－03修回：1998－12－21)

（责任编辑：zxwq）

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