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男性无症状性病高危人群尿沉渣检测沙眼衣原体

中华皮肤科杂志1998年第5期第31卷论著

作者：谢礼豪程文海黄澍杰周康涛卢和琨吴志周戴丽华

单位：529000广东省江门市皮肤病性病防治研究所

关键词：沙眼衣原体；聚合酶链反应；酶联免疫反应

【摘要】目的研究能否用尿沉渣代替尿道拭子检测沙眼衣原体(Ct)。方法分别用Wellcozymechlamydia法和PCR法对352例男性无症状的性病高危人群首段尿沉渣进行Ct检测，两法经尿沉渣、尿道拭子配对研究。结果以尿道拭子Ct培养为金标准，两种方法的敏感性和特异性分别为50.98%(P＜0.05)和100%(P＞0.05)，98.04%(P＞0.05)和96.68%(P＞0.05)。结论对Ct的检测，用Wellcozymechlamydia法时，不宜用尿沉渣代替尿道拭子作标本；而用PCR法时，可用尿沉渣代替尿道拭子作标本。

DetectionofChlamydiaTrachomatisinUrinefromAsymptomaticMalesofSTDHighRiskPopulationXieLihao,ChengWenhai,HuangShujie,etal.JiangmenInstitiuteofDermatology,CenterforSTDPreventionandTreatment,Jiangmen,Guangdong529000

【Abstract】ObjectiveTostudywhetherChlamydiatrachomatis(Ct)canbedetectedinurinespecimens.MethodsThefirstvoidurinesedimentsfrom352asymptomaticmalesofSTDhighriskpopulationweremeasuredbyWellcozymechlamydiaandPCR.ResultsUsingtheurethralswabcultureasgoldstandard,thesensitivityandspecificityofWellcozymechlamydiawere50.98%(P＜0.05)and100%(P＞0.05),andthoseofPCRwere98.04%(P＞0.05)and96.68%(P＞0.05),respectively.ConclusionItissuggestedthaturinesedimentscannotbeusedasthespecimensforthedetectionofCtbyWellcozymechlamydia,andurinesedimentscanbeusedifCtisdetectedbyPCR.

【Keywords】ChlamydiatrachomatisPolymerasechainreactionEnzymeimmunoassay

沙眼衣原体(Chlamydiatrachomatis,Ct)是引起非淋菌性尿道炎的常见病原体之一。临床上Ct实验室诊断一般采取尿道/宫颈拭子作标本。近十余年来，国内外学者用尿液作标本对男性有尿道炎症状患者进行Ct检测取得了较好效果［1，2］，但对男性无症状感染者进行Ct检测，结果报道不一［3，4］。我们用尿道拭子Ct培养作金标准，分别对用Wellcozymechlamydia(WC)法和PCR法检测352例男性无症状的性病高危人群尿道拭子和尿沉渣，并对其敏感性和特异性进行比较，现将结果报道如下。

资料和方法

(一)病例：352例男性患者均符合下列条件，即：①有非婚性接触史或性伴有性病史；②无尿道炎症状和体征；③就诊前2周内未用过抗生素。

(二)取材方法：随机选择部分患者，先取尿道拭子3支，分别插入尿道2cm、3cm、4cm深处。接着取尿液20ml(晨起或隔3小时以上的首段尿)。另一部分患者则为先采取尿标本，后取尿道拭子。

(三)尿标本处理：将尿液分装于2支离心管，以3000r/min离心20分钟，弃掉上清液，将尿沉渣置于4℃冰箱保存(不超过7天)。实验时2支离心管各加入pH7.4磷酸缓冲液或由试剂盒厂家提供的缓冲液，摇匀使之形成悬浮液，随机分配用WC和PCR法测定。

(四)Ct的McCoy细胞培养：参照叶顺章等［5］方法进行。McCoy细胞由广州中山医科大学微生物教研室提供。

(五)WC法检测Ct抗原：采用英国Murex公司生产的检测Ct抗原试剂盒。操作按试剂盒说明进行。

(六)PCR检测CtDNA：采用中国军事医学科学院生产的检测Ct试剂盒。引物为CT-A：5′GGACAAATCGTATCTCGG3′，CT-B：5′GAAACCAACTCTACGCTG3′，操作按试剂盒说明书进行。

结果

一、无症状的性病高危人群不同标本和方法检测Ct的结果详见表1。

表1352例无症状性病高危人群不同标本和方法检测沙眼衣原体的结果

细胞培养WellcozymechlamydiaPCR法合计尿道拭子尿道拭子尿沉渣尿道拭子尿沉渣例数+++++22++-++20+-+++2++-+-1+-+-+2+--++4---++8---+-1----+2-----290(二)无症状的性病高危人群尿道拭子/尿沉渣WC法检测Ct结果：用WC法检测尿道拭子、尿沉渣中Ct抗原，两种标本检测结果均阳性22例，均阴性305例。尿道拭子阳性、尿沉渣阴性21例。尿道拭子阴性、尿沉渣阳性4例。经配对计数资料χ2检验，χ2=10.29，P＜0.01，差异有显著性。

(三)无症状的性病高危人群尿道拭子/尿沉渣PCR检测Ct结果：用PCR法检测尿道拭子/尿沉渣CtDNA，两种标本检测结果均阳性有56例，均阴性有290例。尿道拭子阳性、尿沉渣阴性2例。尿道拭子阴性、尿沉渣阳性4例。经配对计数资料χ2检验，χ2=0.17，P＞0.05，差异无显著性。

(四)以尿道拭子Ct培养作金标准，用WC法和PCR法检测尿道拭子/尿沉渣中Ct敏感性和特异性见表2。表2Wellcozymechlamydia法和PCR检测尿道拭子/尿沉渣中

沙眼衣原体敏感性和特异性比较

方法敏感性(%)P值特异性(%)P值Wellcozymechlamydia尿道拭子84.31(43/51)＞0.05100(301/301)＞0.05尿沉渣50.98(26/51)＜0.05100(301/301)＞0.05PCR尿道拭子96.08(49/51)＞0.0597(292/301)＞0.05尿沉渣98.04(50/51)＞0.0596.68(291/301)＞0.05讨论

在泌尿生殖道Ct感染中无临床症状的病例占相当比例，国外报道约占1/3［6］，国内廖明敏等［7］报道约占1/2，成为沙眼衣原体的主要传染源。目前临床上检测Ct的方法很多，一般都是采用尿道/宫颈拭子作标本。取男性患者尿道拭子常引起局部疼痛不适，容易损伤尿道粘膜，部分患者难以接受。长期以来，人们一直希望能用尿液检测Ct。早期研究表明用尿标本进行Ct培养的阳性率很低。直到Ct非细胞培养法应用以后，证实能够用尿液作标本检测男性有症状非淋菌性尿道炎Ct抗原或DNA［1，2］。但对是否能同样用于检测男性无症状的性病高危人群，目前尚有争论［3，4］。

本组352例男性无症状的性病高危人群，以尿道拭子Ct细胞培养作金标准，用WC法检测尿沉渣Ct的敏感性和特异性分别为50.98%和100%；用PCR法检测尿沉渣Ct的敏感性和特异性分别为98.04%和96.68%。表明用PCR法检测男性无症状的性病高危人群的Ct感染，用尿沉渣作标本具有较高的敏感性和特异性，可以替代尿道拭子，这对大规模人群感染调查具有一定意义。而WC法检测男性无症状性病高危人群尿沉渣Ct的敏感性较低，其原因可能是，此法是一种酶联免疫法，少量的Ct包涵体往往不足以产生抗原抗体反应。对这个问题的解决，是否可以增加尿液标本量或提高离心速度，尚有待进一步研究。

志谢第一军医大学南方医院谭仲楷教授审阅

参考文献

1QuinnTC,WelshL,LentzA,etal.DiagnosisbyAMPLICORPCRofChlamydiatrachomatisinfectioninurinesamplesfromwomenandmenattendingsexuallytransmitteddiseaseclinics.JClinMicrobiol,1996,34∶1401-1406.

2程文海,徐广坤.利用男性非淋菌性尿道炎患者尿沉渣检测沙眼衣原体.临床皮肤科杂志,1997,26∶9-11.

3FurrellDJ,HaranMV,ParkBW.ComparisonofPCR/nucleicacidhybridizationandEIAforthedetectionofChlamydiatrachomatisindifferentpopulationsinaregionalcentre.Pathology,1996,28∶74-78.

4LeonardiGP,SeitzM,EdstromR,etal.EvaluationofthreeimmunoassaysfordetectionofChlamydiatrachomatisinurinespecimensfromasymptomaticmales.JClinMicrobiol,1992,30∶2793-2796.

5叶顺章,张木友主编.性传播疾病实验室诊断手册.广州:广东科技出版社,1991.46-47.

6ShafterMA,PragerV,ShalwitzJ,etal.PrevalenceofurethralChlamydiatrachomatisandNeisseriagonorrhoeaeamongasymptomaticsexuallyactiveadolescentboys.JInfectDis,1987,156∶223-225.

7廖明敏,顾伟鸣,乐嘉豫,等.性病高危人群沙眼衣原体感染初步调查.中华皮肤科杂志,1991,24∶253-254.

（责任编辑：zxwq）

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